徠卡冰凍切片機(jī) (frozensection)是一種在低溫條件下使組織快速冷卻到必定硬度,然后進(jìn)行切片的辦法。因其制造進(jìn)程較白臘切片方便、簡(jiǎn)便,而多應(yīng)用于手術(shù)中的快速病理確診。制造一張出色的冰凍切片,確保切片質(zhì)量的一起,又要前進(jìn)手術(shù)中快速病理確診的準(zhǔn)確率,那么這跟對(duì)冰凍切片機(jī)的知道和選擇有很大關(guān)系。下面就常用的徠卡冰凍切片機(jī) 的分類(lèi)、原理做簡(jiǎn)略的拾掇和概括。
徠卡冰凍切片機(jī)首要分為兩大類(lèi),即冰凍切片機(jī)(FreezingMierotome)和低溫恒冷冰凍切片機(jī)(Cryostat)。
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1.冰凍切片機(jī)
一般是由輪轉(zhuǎn)式切片機(jī)或推拉式切片機(jī)加上致冷設(shè)備而成的。常用的致冷設(shè)備有二氧化碳冷凍設(shè)備和半導(dǎo)體冷凍設(shè)備。
(1)二氧化碳致冷器的基本原理是選用二氧化碳?xì)怏w凍住組織。切片機(jī)往往與一個(gè)二氧化碳鋼瓶相連,使氣體能通向切片機(jī)的載物臺(tái),有的還可通向切片刀。切片時(shí)打開(kāi)二氧化碳?xì)忾T(mén),氣體即通過(guò)管道噴出。由于許多吸熱,載物臺(tái)(又稱(chēng)冷凝臺(tái))及其上的組織敏捷冷卻,切片刀的溫度也相應(yīng)下降,即可切片。組織和切片刀的溫度可通過(guò)恰當(dāng)控制開(kāi)關(guān),改動(dòng)二氧化碳?xì)饬鞯木藜?xì)進(jìn)行調(diào)理。
(2)半導(dǎo)體致冷器的基本原理是運(yùn)用Peltier效應(yīng)。Peltier觀察到當(dāng)直流電通過(guò)兩種不同的金屬時(shí),即在這兩種金屬接壤的一個(gè)面發(fā)生熱量,另一面損失熱量。根據(jù)這一原理做成熱電微型元件,即將多個(gè)溫差電偶按必定的順序排列起來(lái),構(gòu)成一個(gè)較大的界面,當(dāng)直流電通過(guò)期,電偶的一端發(fā)熱,另一端致冷。將這種設(shè)備用于冰凍切片,可將溫度比較精確地控制到-30℃士0.1℃,并可長(zhǎng)久保持穩(wěn)定。電偶吸熱端和放熱端之溫差在必定規(guī)劃內(nèi)與電流的巨細(xì)成正比,電流越大,溫差就越大。但電流超過(guò)必定規(guī)劃后,溫差反而下降。大溫差時(shí)通過(guò)電偶的電流即為“較佳電流”,如果有循環(huán)水等散熱辦法將放熱端予以冷卻,則吸熱端的溫度將隨之下降,半導(dǎo)體冰凍切片就是運(yùn)用電偶的吸熱端冷卻組織,使之硬化而制造切片。
上述切片機(jī)都置于室溫內(nèi)進(jìn)行切片,所以都具必定的局限性,如切片往往較厚,并且易與刀粘著,需要恰當(dāng)嫻熟的技巧才干取得滿(mǎn)意的切片。
2.低溫恒冷冰凍切片機(jī)
50年代中期,開(kāi)端有人將低溫恒冷冰凍切片機(jī)用于病理確診,使冰凍切片的質(zhì)量和速度都有了很大的前進(jìn)。
低溫恒冷冰凍切片機(jī)實(shí)際上就是將通過(guò)改進(jìn)的切片機(jī)置于一個(gè)冷凍室內(nèi),與電冰箱致冷原理相同,運(yùn)用壓縮機(jī)通過(guò)氟利昂循環(huán)致冷。切片機(jī)的操作大部分在冷凍室外進(jìn)行?,F(xiàn)在常用的切片機(jī)為輪轉(zhuǎn)式的。低溫恒冷切片機(jī)又分為全封閉式和頂部開(kāi)放式。頂部開(kāi)放式的切片機(jī)上部有一大的滑動(dòng)玻璃窗,通過(guò)此窗放入組織,調(diào)整切片機(jī),進(jìn)行切片。本機(jī)可以自在選擇溫度、切片厚度,制片敏捷,可以接連切片,染片質(zhì)量可與常規(guī)白臘切片比美,并且組織內(nèi)的生物活性物質(zhì)保存出色,適用于組織化學(xué)、免疫熒光和免疫組織化學(xué)等染色。制片溫度選擇可按組織類(lèi)型及切片厚度而定,大多數(shù)組織以-15℃~-20℃為宜,脂肪組織所需溫度更低,可加用干冰冷凍。