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奧林巴斯熒光顯微鏡的持點(diǎn)

更新時(shí)間:2012-06-20   點(diǎn)擊次數(shù):2189次

奧林巴斯熒光顯微鏡的持點(diǎn)

奧林巴斯熒光顯微鏡是普通顯微術(shù)的重大發(fā)展。它具有*的*性。熒光顯微術(shù)是在黑閱內(nèi)背景下觀察標(biāo)‘杠的形色圖象,有良好的反劉,故觀察清楚、方便,易哥:鑒別,眼睛也不員疲勞。由于熒光染色素的濃度極?。▋x1:Iooo00)便能發(fā)出明亮的熒光,因此一般油機(jī)體眾說(shuō)是無(wú)動(dòng)的,為活體觀察,如研究功能器官的過(guò)程和細(xì)微糾構(gòu),某些代謝過(guò)程的變化等,提供了廣泛的可能性。另外,英光色素染色法比較簡(jiǎn)軋時(shí)間路標(biāo)木制作客只,特別適于快速工億如傳染病的快速診斷等。

(1)奧林巴斯熒光顯微鏡可用明視場(chǎng)改暗視場(chǎng)方洗但”—般用睹權(quán)場(chǎng)效果較好,因?yàn)樗a(chǎn)生的現(xiàn)場(chǎng)背景是黑的,圖象反襯強(qiáng),;十;?立沒(méi)有明視場(chǎng)方便。至于透射熒光還是反射熒光,一般來(lái)說(shuō),反射熒光應(yīng)用范圍廣一以它不僅適用觀察普通標(biāo)刺;,而且還能現(xiàn)察不適明標(biāo)本。

奧林巴斯熒光顯微鏡根據(jù)激發(fā)光波長(zhǎng)的特點(diǎn),熒光顯微術(shù)可用紫外光或紫藍(lán)光激發(fā)。蒙外光的特點(diǎn)在1:i4觀察機(jī)體組織的自體熒光<如核酸及金剛石等)在組織華工d:中便于區(qū)別背景熒光和染色目標(biāo)的熒光。但陜點(diǎn)是:常常會(huì)引起標(biāo)4;熒光的光致淬滅,標(biāo)本難以重復(fù)觀察,并且沙顯微攝影發(fā)生團(tuán)難。另外對(duì)活體標(biāo)本有叨顯的殺傷作用,對(duì)長(zhǎng)期從事這項(xiàng)工作人員的暇睛也有傷害。特別是對(duì)絕大多數(shù)的熒光色素來(lái)說(shuō),紫外區(qū)不是zui大的光譜吸收風(fēng)因而不能得到先分的激發(fā)。而紫藍(lán)光卻沒(méi)有以上—些缺點(diǎn),但不足的是不能激發(fā)組織的自體熒光,因此不適于研究組織的白體熒光結(jié)構(gòu)。對(duì)于個(gè)別焚光色素,知羅達(dá)明R200,可用波長(zhǎng)更長(zhǎng)的藍(lán)綠光作為激發(fā)光為依。

(2)奧林巴斯熒光顯微鏡所觀察的熒光圖象,主要以兩個(gè)指標(biāo)判斷結(jié)果,一是形態(tài)學(xué)特征,二是熒光的亮度。在免疫焚光工作巾,尤其是這樣,必須將兩者結(jié)合起來(lái)綜合判斷不可偏皮。糾果記錄是根據(jù)主觀指標(biāo)或客觀指標(biāo),但一般常是憑工作者日力觀察的主觀指標(biāo)由于這是定性的觀察,所以記錄的度較差。隨著科學(xué)校木的發(fā)展,采用客觀指標(biāo)記錄結(jié)果巳開(kāi)始應(yīng)用。

1、用不同序度的中性濾片‘插入激發(fā)濾片和標(biāo)本之間的光路中,以看焚光減駒的極度;

2、不同標(biāo)本以相同的隕光時(shí)間進(jìn)行顯檄攝影,然后用光密度計(jì)測(cè)定膠卷圖象;

3、直接用熒光計(jì)測(cè)熒光色素和兔疫熒光染色的鏡下標(biāo)本,

4、用光敏電池漏光表Z;愧網(wǎng)象的亮度,或者與掃描裝置結(jié)備對(duì)視場(chǎng)的特定部位進(jìn)行掃描等,如熒光顯微光度計(jì)。

奧林巴斯熒光顯微鏡對(duì)于觀察透明度差的標(biāo)本,以及各種活體組織時(shí),需采用反射光熒光裝置。其反射光熒光裝置的特點(diǎn)是:從光源來(lái)的混合光射到干涉分光濾鏡后,波長(zhǎng)短的部分(榮外和紫藍(lán))由于濾鏡上鍍膜的性質(zhì)而反射,當(dāng)濾鏡對(duì)向光源呈45。傾斜時(shí),則垂直射向物鏡,’經(jīng)物鏡射向標(biāo)久使標(biāo)本受到激發(fā),這時(shí)物鎮(zhèn)直接起看聚光器的作用,同時(shí)波長(zhǎng)氏的部分(綠、黃、紅等)能透過(guò)濾鏡比因此不向物鏡方向反射,濾鏡起到了激發(fā)濾板的作用,由于標(biāo)本的熒光是處在可見(jiàn)光長(zhǎng)波區(qū);故對(duì)濾鏡也是可以透過(guò)的,因此能透射到目鏡以供觀察。根拇所需要激發(fā)光不同,干涉分光濫鏡可以更換。

備注:奧林巴斯熒光顯微鏡的持點(diǎn)部分文章由http://www.cnnoptics.com/,編輯上傳。

 

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