徠卡激光掃描共聚焦顯微鏡中掃描和檢測裝置

掃描和檢測裝置是徠卡激光掃描共聚焦顯微鏡的重要組成部分，它直接關(guān)系到儀器的情吸比，分辨率等重要指標(biāo)。要獲得高清晰度、高對比度、高分辨率的圖像，必須以光點(diǎn)對所要成橡的樣品范圍內(nèi)各點(diǎn)逐點(diǎn)掃描，并通過檢測器將信號轉(zhuǎn)化為電脈沖，經(jīng)放大轉(zhuǎn)換處理形成一個(gè)完整的二維圖像。

如圖2—4所示的尼普科夫（NiPkov）盤就是早期出現(xiàn)的掃描成像技術(shù)的一個(gè)典型實(shí)例。其方法是在一個(gè)不透明的圓盤k開一系列矩形小孔，各孔的位置相對于圓盤中心的角,間隔恒定，而半徑（r）是以一定比例縮短。圓盤以一定速度旋轉(zhuǎn)從而將完整的被測平面圖像分解成順序掃描點(diǎn)，用光電管檢測各圖像元素，并驅(qū)動氖泡，通過尼普科夫盤的另—部分觀察成像。

如今．隨著對生物結(jié)構(gòu)的研究和分析的需要，借助高度發(fā)達(dá)的電子器件控制技術(shù)，通過計(jì)算機(jī)*可以使掃描和檢測裝置達(dá)到一個(gè)很高的性能。

目前，在大部分徠卡激光掃描共聚焦顯微镕中被廣泛應(yīng)用的掃描裝置主要有兩類：臺階掃描和光束掃描，我們也可按此來區(qū)別徠卡激光掃描共聚焦顯微鏡的類型。

一、臺階掃描：是出現(xiàn)較早的掃描方式。其原理是樣品相對于光束作移動，—般是以一套由計(jì)算機(jī)控制的可微調(diào)步距的步進(jìn)電機(jī)系統(tǒng)驅(qū)動載物臺按掃描要求作X軸和Y軸方向移動，而光束沿徠卡顯微鏡光軸在鏡頭中心保持固定。這就使得對樣品各點(diǎn)進(jìn)行掃描時(shí)．具有無相差的光學(xué)持性，簡化了*色、相差校正設(shè)計(jì)相光路調(diào)整，而且信號總是處于zui強(qiáng)狀態(tài)，分辨大大提高，特別是在掃描小樣品（＜5ym）時(shí)相對于其它掃描方式尤為突出。即使是在高放大倍數(shù)圖像時(shí)，也能以相同質(zhì)量婦描整個(gè)樣品，定量采樣時(shí)重復(fù)性好，觀察范圍不受目鏡視野范圍的限制，具有提供高質(zhì)量圖像的潛能。其弱點(diǎn)是掃描時(shí)間長，理由1：單次掃描即可建立圖像，所以從成像的總體時(shí)間k看差距個(gè)甚明顯。

二、光束掃描：主要有鏡掃描，這種方式目前較為普遍，工作時(shí)樣品保持不動，通過一個(gè)檢流計(jì)控制鏡子方向變化運(yùn)動，使光束可按要求對樣品作點(diǎn)或線掃描，其zui大特點(diǎn)是速度快，在對活體的研究方面的掃描方式。但由于光束會對物鏡造成偏軸掃描，光學(xué)質(zhì)量受影響，照射區(qū)域受限制，信號強(qiáng)度和分辨離減低。

備注：徠卡激光掃描共聚焦顯微鏡中掃描和檢測裝置的部分文章由北京中儀光科科技有限公司編輯整理上傳。